T∕GDBIHQDA 0003-2024 灵芝及灵芝提取物中β-葡聚糖的测定

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2024/9/5

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ICS 67.050,CCS X83,团体标准,T/GDBIHQDA 0003-2024,灵芝及灵芝提取物中β-葡聚糖的测定,(Determination of β-glucan in Ganoderma lucidum and Ganoderma,lucidum extracts),2024-08-02 发布2024-08-02 实施,广东省生物医药产业高质量发展协会发布,1,T/GDBIHQDA 0003-2024,前言,本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规,则》的规定起草,请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任,本文件由广东省生物医药产业高质量发展协会提出并归口,本文件起草单位:无限极(中国)有限公司、天方健(中国)药业有限公司、安徽金寨乔,康药业有限公司、龙泉市科达信息科技有限公司、广东省科学院生物与医学工程研究所、,广州中医药大学、广东药科大学、广州市食品检验所、南昌检验检测中心、广东省生物医药,高质量发展协会,本文件主要起草人:罗其昌、娄勇军、蒋伶俐、宁德山、杨清苑、廖伟玲、练妍、范勇,成、唐青涛、刘耀军、游淦秀、江庆伍、张煜、郭秀良,郭翠平,陈聪、高裕锋、黄雪影、,刘志鹏、张志强、陈其钊、黄敏兴、程巧云、杨维、万璋妃、严萍、芮雯、陈春艳、张豪、,周静、向艳、冯德悦、郭栩廷、王钰佳、葛瑾雯、鲁丽丽、周洁、刘杰、符美坚、周玉莹、,郭剑雄、刘丽梅,2,T/GDBIHQDA 0003-2024,灵芝及灵芝提取物中β-葡聚糖的测定,1 范围,本文件规定了灵芝及灵芝提取物中β-葡聚糖的分光光度检测方法,本文件适用于灵芝子实体,灵芝孢子粉和灵芝提取物中β-葡聚糖的测定,2 规范性引用文件,下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期,的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括,所有的修改单)适用于本文件,GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法,3 术语和定义,下列术语和定义适用于本标准,3.1 灵芝,灵芝俗称灵芝草、菌灵芝,在分类学上隶属担子菌门,伞菌纲,多孔菌目,灵芝科,灵,芝属,包括赤芝和紫芝,3.2 灵芝孢子粉,灵芝子实体在成熟时弹射出的担孢子粉,3.3 灵芝提取物,适时采收成熟的新鲜灵芝子实体,烘干后采用热水浸提(或酒精提取)、真空浓缩、喷雾,干燥等工艺,得到的灵芝浸有粉,是灵芝粉高倍浓缩而成的灵芝精华,3.4 β-葡聚糖β-glucan,一种多糖化合物,由葡萄糖分子通过β-1,3-和β-1,6-糖苷键连接而成,可溶于水的一系列,高分子化合物,4 原理,灵芝子实体,灵芝孢子粉和灵芝提取物中β-葡聚糖和α-葡聚糖经水提取,使用α-淀粉酶,和淀粉葡萄糖苷酶(糖化淀粉酶)酶解α-葡聚糖成单糖和寡糖;使用纤维素酶酶解纤维素成,单糖和寡糖;使用蛋白质酶酶解蛋白质成氨基酸;乙醇沉淀β-葡聚糖,单糖、寡糖和氨基酸,溶于乙醇被除去;β-葡聚糖经水溶解,在硫酸的作用下,先水解成单糖,并迅速脱水形成糖,醛化合物,与苯酚形成黄色化合物,在485 nm下具有特征吸收,与标准系列比较定量,3,T/GDBIHQDA 0003-2024,5 试剂和材料,除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水,5.1 试剂,5.1.1 硫酸(H2SO4),5.1.2 无水乙醇(C2H6O),5.1.3 苯酚(C6H5OH),5.1.4 盐酸(HCI),5.1.5 氢氧化钠(NaOH),5.1.6 β-葡聚糖对照品(CAS:9012-72-0,纯度≥98%),5.1.7 α-淀粉酶(CAS:9000-85-5,20000 - 60000 U/mL),5.1.8 纤维素酶(CAS:9012-54-8,≥45 U/mg),5.1.9 蛋白酶(CAS:9014-01-1,≥200 U/mg),5.1.10 淀粉葡萄糖苷酶(CAS:9032-08-0,≥10 万U/mL),5.1.11 盐酸溶液(0.2 mol/L):取17.00 mL 盐酸在搅拌状态下缓慢加入到800 mL 水中,混匀,冷却后用水稀释至1000 mL,即得,5.1.12 氢氧化钠溶液(0.2 mol/L):取8.00 g 氢氧化钠在搅拌状态下缓慢加入到800 mL,水中,混匀,冷却后用水稀释至1000 mL,即得,5.1.13 β-葡聚糖对照品溶液制备(0.1 mg/mL):精密称取β-葡聚糖对照品10 mg,加水溶,解并定容至100 mL,混匀,即得0.1 mg/mL 的β-葡聚糖对照品溶液,5.1.14 苯酚溶液(50 g/L):称取苯酚5.0 g,加水溶解并定容至100 mL,混匀,即得,5.1.15 80%乙醇溶液:量取200 mL 水加入到800 mL 无水乙醇中,混匀,即得,6 仪器与设备,6.1 分光光度计,6.2 分析天平:感量为0.00001 g 和0.01 g,6.3 电热恒温振荡水浴锅:温度波动±1℃,6.4 冰箱,6.5 离心机:转速不低于3000 r/min,6.6 漩涡混合振荡器,6.7 pH 计,6.8 样品粉碎机,6.9 0.45 mm 标准网筛,7 分析步骤,7.1 样品前处理,7.1.1 样品制备,取不少于200 g具代表性样品,用样品粉碎机粉碎(灵芝孢子粉和灵芝提取物等粉状样,品无须粉碎),过0.45 mm标准网筛,将样品装于密封容器中,保存备用,4,T/GDBIHQDA 0003-2024,7.1.2 样品提取,取样品0……

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